肉制品中吲哚残留量的高效液相色谱分析
时间：2021-02-05 08:00:57 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
摘要：建立一种采用高效液相色谱法（HPLC）测定加工肉制品中吲哚残留量的新方法。样品经纯甲醇提取后，采用HLB固相萃取柱净化，用高效液相色谱C18柱分离，水-乙腈作为流动相，流速为1.0 mL/min，柱温为30 ℃，紫外检测波长为275 nm，外标法定量。吲哚的浓度在10～100 μg/L内有较好的线性关系，R2大于0.99，回收率为93.5%～97.4%，RSD小于15%（n=10）。该法简单，灵敏度高，重复性好，适用于动物源性食品中吲哚残留量的测定。
关键词： 吲哚; 高效液相色谱; 残留
中图分类号：O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）23-6015-03
DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.23.056
Content Determination of Indole in Meat Products Processing by HPLC
SHI Xiao-yan
（Department of Career Technical， Jiangsu Food and Drug of Medicine and Health Management College， Huaian 223003， Jiangsu， China）
Abstract： To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） method for determination of indole residues in meat food， samples were extracted with methanol， purified with HLB solid phase extraction column， separated by C18 chromatography column. Water-acetonitrile was acted as the mobile phase with gradient elution， the flow rate was 1.0 mL/min， column temperature was 30 ℃，the detection wavelength was 275 nm with external standard method. Indole concentration in 10～100 g/L had good linear relationship， regression coefficient was more than 0.99， the recoveries were in the range of 93.5%～97.4%，the relative standard deviation was less than 15%（n=10）. The method was simple， rapid， sensitive， suitable for determination of indole residues in animal origin food.
Key words：indole;high performance liquid chromatography;residues
吲哚是吡咯与苯并联的化合物，又称苯并吡咯，结构如图1所示。熔点在51～54 ℃之间，密度为1.14 g/cm3[1]。吲哚及其同系物和衍生物广泛存在于自然界中，主要存在于天然花油中，如茉莉花、水仙花、香罗兰等中。吲哚是一种重要的有机原料和精细化工产品，是动物必需氨基酸色氨酸的衍生物，植物生长素（吲哚-3-乙酸）、抗炎药物消炎痛、生物碱及色素中也包含有吲哚结构。由于吲哚在化工中被广泛应用，必须控制在允许范围内，避免对人体健康带来威胁[2-4]。
高效液相色谱法以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术[5-7]。本试验通过高效液相色谱来测定肉制品中吲哚的含量，该方法简单、可操作性强，灵敏度高。
1 材料和方法
1.1 材料与试剂
食源性肉制品（市售）;吲哚标准品（中国药品生物制品研究所）;甲醇、乙酸乙酯、乙腈（美国Sigma公司）;去离子水（Millipore公司）
1.2 仪器和设备
LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津公司）;Oasis HLB固相萃取柱（3 mL/60 mg，美国Waters公司）;Symmetry C18反相色谱柱（5 μm，4.6 mm× 250 mm，美国Waters公司）;高速离心机（美国Beckman公司）;
1.3 标准品配制
准确称取吲哚标准品各10 mg（精确至0.001 g），用甲醇分别溶解并定容于100 mL棕色容量瓶中，制备成100 μg/mL的吲哚标准品储备溶液，4 ℃下冰箱保存。
1.4 工作溶液配制
准确量取一定量吲哚标准储备溶液，用甲醇定容于100 mL棕色容量瓶中，分别制备成100、80、40、20、10 μg/L的工作溶液。
1.5 色谱条件
Symmetry C18反相色谱柱; 柱温为30 ℃; 流速为1 mL/min; 进样量为10 μL;流动相：水∶乙腈（65∶35，V/V）;检测波长为275 nm。标准品色谱图见图2
