骨碎补不同炮制品中总黄酮与柚皮苷的含量测定|骨碎补总黄酮
时间：2019-05-13 03:12:48 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】1672－3783(2012)06－0326－01 【摘要】:目的:通过考察骨碎补不同炮制品中总黄酮与柚皮苷的含量，来确定其最佳的炮制方法；方法:用分光光度法测定骨碎补不同炮制品中总黄酮的含量.用高效液相色谱法测定柚皮苷含量。结果与结论:骨碎补经去毛净制后,可提高总黄酮及柚皮苷的含量。
骨碎补是较常用的中药，具有补肾强骨，活血续伤之功效。骨碎补活性成分为柚皮苷等二氢黄酮类化合物［1,2］，为了考察不同炮制方法对骨碎补有效成分的影响，我们用分光光度法测定骨碎不同炮制品（生品骨碎补、砂烫骨碎补、酒骨碎补）中总黄酮的含量，用高效液相色谱法测定柚皮苷含量。
1 实验材料
1．1 药品
骨碎补购自湖北，经鉴定均为水龙骨科植物槲蕨Drymaria fortunei (Kunze)J.sm. 的干燥根茎。
1．2 炮制品
生品：（1）除祛杂质，洗净，未去毛。（2）鲜骨碎补洗净，除祛杂质，去毛。
砂烫骨碎补：取沙子置锅内，用武火加热后，加入净骨碎补或片，不断翻动，烫至鼓起时，取出，筛去沙子，撞去毛，放凉。
酒骨碎补：取去毛骨碎补片，加酒拌匀，用文火炒干为度，每骨碎补１００Ｋg，用酒或白酒１０Ｋg。
1．3 仪器
7520型分光光度计，1050型液相色谱仪（惠普公司）；LA-204型电子天平（常熟市衡器厂）。
2、 实验方法与结果
2．1 总黄酮含量测定方法与结果
标准曲线制备
精密称取柚皮苷对照品4.9mg，置50ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，作为对照品溶液，再分别吸取对照品溶液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml于10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，以甲醇为空白，在283nm处测吸收度，以吸收度（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，经回归得标准曲线方程A=0.0292C-0.0577，r=0.9998，线性范围4.9~29.4μg.ml-1.
2.2 骨碎补不同炮制品样品溶液制备及测定
精密称取骨碎补各炮制品干燥粉末(经80℃干燥4小时,过40目筛)1 g,置索氏提取器中，分别用50毫升甲醇提取12小时，将提取液转移至100毫升容量瓶中，甲醇定容至刻度，精密 吸取1毫升于25毫升容量瓶中，甲醇定容至刻度，于283纳米处测定吸收度，按回归方程计算总黄酮含量
未去毛的骨碎补甲醇提取液中总黄酮的含量平均值却为4.1，其它四组数据的平均值都在5.0左右，数据相差的很大，可见骨碎补经去毛炮制可使总黄酮在甲醇提取液中的含量增加，从而提示我们经去毛炮制有利于有效成分的溶出。
2.3 柚皮苷含量测定
标准曲线的制备及回收率实验结果 精密称取对照品柚皮苷12.2mg，以甲醇定容于25ml容量瓶中，精密吸取1ml，置于10ml容量瓶中，以甲醇定容至刻度，此为对照品溶液。分别精密量取对照品溶液0.2，0.5，1，2，3ml，分别置于10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度。再分别精密吸取2ml，置于10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，待测定。分别精密吸取定容液50μl，注入液相色谱仪中测定，分别得到峰面积为11.55，29.77，59.93，115.38，175.69。所得数据经统计学处理，得回归方程Y=1.19450512X+0.2939272,r=0.9999,线性范围为9.76~146.4ng。加样回收率实验结果显示回收率达到98.8%（n=5），RSD=1.91%。
2.3.2 样品溶液制备及测定 按照《中国药典》一部骨碎补药材项下柚皮苷的含量测定规定［1］，制备骨碎补不同炮制品（40目粉）待测液，以1050型高效液相色谱仪测定柚皮苷的含量
3、 讨论
骨碎补不同炮制品甲醇提取液中总黄酮含量测定结果表明,去毛生品与砂烫骨碎补、酒骨碎补、盐骨碎补总黄酮含量相当，且去毛生品总黄酮含量高于未去毛生品。故实际应用骨碎补时应用去毛炮制品，且骨碎补其它炮制品也应用去毛后的制品再炮制。
骨碎补不同炮制品柚皮苷含量测定结果表明，去毛生品与砂烫骨碎补、酒骨碎补、盐骨碎补柚皮苷含量相当，且明显高于未去毛生品，这与总黄酮含量测定结果具平行性。
通过上述实验结果分析，临床应用砂烫骨碎补可净制去毛，而且用砂烫骨碎补炮制的酒骨碎补、盐骨碎补与砂烫骨碎补一样，不影响总黄酮及柚皮苷含量，且有利于有效成分的溶出。本实验为用砂烫法炮制骨碎补，及现代用砂烫骨碎补炮制酒骨碎补、盐骨碎补提供了依据。并为实际临床应用时采取哪种炮制饮片方法更为适宜提供了相应的依据。
参考文献
［1］ 王维信,王敖格.骨碎补双氢黄酮苷对体外培养心肌细胞的影响及其作用机理分析.中国药学会庆祝建会80周年学术会议论文集,1987,06-K-2。
［2］ 周铜水,周荣汉,刘晓东.骨碎补对大鼠实验性骨折损伤愈合的影响.中草药,1994,25(5):249。
