KL-6评估特发性肺纤维化病变程度的临床价值*
时间：2023-06-19 19:30:06 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
王静 苗姝 佟金平 王涛
(1.大连大学附属新华医院呼吸与危重症医学科，辽宁 大连 116021；
2.大连大学附属中山医院呼吸与危重症医学一科，辽宁 大连 116001)
特发性肺纤维化(Idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)是一组病因未明、以弥漫性肺泡炎症、肺泡结构紊乱、肺间质纤维化改变为病理特征的间质性肺病[1]。目前在临床指南中虽有吡非尼酮、尼达尼布等抗纤维化药物，但治疗效果仍不理想，5年存活率无明显改善[2]。在临床中通常采用高分辨CT(HRCT)显示的双下肺“蜂窝影”及肺功能作为诊断及评估特发性肺纤维化的重要标准和病情的严重程度，但出现这些典型的临床特征时患者通常已经进入晚期，同时存在呼吸困难的一些老年患者常无法完成肺功能检查，对病情严重程度的评估造成困难[3-4]。因此寻找早期诊断IPF、评估IPF严重程度的无创性生物标记物成为近几年间质性肺病研究领域的热门方向。已有的研究证实Ⅱ型肺泡上皮细胞(Type Ⅱalveolar epithelial cells， AECsⅡ)在慢性持续性损伤病理条件下会诱导肺间质肌成纤维细胞聚集与细胞外基质沉积，成为启动IPF进展的重要环节[5]。国外基础研究发现涎液化糖链抗原6(Krebs von den lungen-6，KL-6) 是AECsⅡ损伤后持续性分泌的一种黏蛋白样糖蛋白，能够反映肺纤维化病理条件下AECsⅡ的损伤程度[6]。国外最新研究也报道了KL-6的表达水平与IPF的严重程度、生存预后存在明确的相关性[6-7]。但国内对KL-6在IPF患者中的临床价值及其临床应用几近空白。因此，本研究检测IPF患者血清及肺泡灌洗液中KL-6的表达水平，根据KL-6的表达水平，分析KL-6与IPF病情严重程度的相关性，为将来作为IPF早期诊断、病情监测、预后评估提供理论依据。
1.1 一般资料 选取2017年3月～2021年3月在大连大学附属新华医院门诊、住院诊断及治疗的 IPF患者作为本研究的观察组，共80例，其中男性70例，女性10例；
年龄53～78岁，平均(62.48 ±5.76) 岁；
病程8～36(14.76±5.67)个月。同时选取在本院门诊体检的同年龄段、性别比例一致的正常人群作为本研究项目的健康对照组，共80例。IPF的诊断标准符合2011年美国胸科学会/欧洲呼吸学(ATS/ERS/JRS/ALAT)定制的诊断标准。排除标准：近2个月内曾使用糖皮质激素、免疫抑制剂等药物治疗者；
合并恶性肿瘤、严重肝肾疾病、糖尿病等代谢性疾病者。IPF急性加重(AEIPF)的诊断标准: ①IPF患者近1月内出现不明原因的呼吸困难加重。②高分辨率CT(HRCT)在原有病变基础上出现新发双肺磨玻璃影伴或不伴实变影。③缺乏直接的感染证据。④除外左心衰、肺栓塞、急性肺损伤等诱因。根据该判定标准，在80例IPF患者中，10例患者发生了AEIPF，剩余70例患者均处于稳定期。本项目经大连大学附属新华医院伦理委员会审核批准(20220321)。
1.2 观察指标
1.2.1 肺功能全套检测 两组患者均使用肺功能仪(德国耶格Master Screen Pneumo )进行检测，检测指标包括：用力肺活量(Forced vital capacity，FVC)、1秒用力呼气容积占预计值百分比(forced expiratory volume in one second /predict value，FEV1% pred)及一氧化碳弥散量占预计值的百分比(DLco% pred)。
1.2.2 HRCT检查 使用美国GE公司Light SpeedVCT 64排螺旋CT扫描仪对所有入组患者进行HRCT检查。仰卧位，先行平扫，呼气末自肺尖扫描至膈顶进行扫描。层厚1.25 mm、准直1.5 mm、层间距10 mm、管电流250 mA、电压120 kV、矩阵512×512扫描结束后行高空间分辨率重建，视野45 mm×45 mm。肺窗(窗宽2000HU、窗位-550HU)、纵膈窗(窗宽450HU、窗位55HU)拍摄CT片，重点观察间质的病变。以主动脉弓、右下肺静脉为界限，分为左右上、中、下3个肺区，观察各个肺区病变及受累情况，肺纤维化程度的量化评分参照文献进行[8]。
1.2.3 ELISA检测血清与支气管肺泡灌洗液(BALF)总KL-6的表达水平 采用酶联免疫吸附法(ELISA，购于武汉三鹰生物科技有限公司)检测两组患者血清KL-6的表达水平。ELISA 检测观察组BALF中KL-6的表达水平。于空腹状态抽取的肘静脉血，3000 rpm条件下离心，时间10 min，分离上层血清，-80℃冰箱保存备用。依据说明书，采用KL-6 ELISA 试剂盒上样检测。
1.2.4 BALF的留取 术前常规雾化利多卡因进行吸入麻醉(20 min)。麻醉结束后再行检支气管镜的检查，选择右肺中叶或左肺舌叶进行灌洗，灌洗量约50 mL的生理盐水进行灌洗， 回收率需要>30%。回收后的BALF离心保存方法同前。
2.1 一般资料比较 对照组与观察组在性别、年龄、吸烟史、体重指数方面的比较，差异均无统计学意义 (均P>0.05)。与健康对照组相比，肺功能指标FVC% pred、FEV1% pred、DLco% pred指标均明显下降，差异有统计学意义(均P<0.01)。
表1 两组临床资料的对比
2.2 KL-6在两组血清中表达含量的比较 KL-6在IPF组患者外周血中的表达水平均显著高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.01)；
KL-6在BALF液中的表达水平同样也高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表2。
表2 KL-6在两组患者血清中表达含量的比较
2.3 不同HRCT评分患者KL-6水平比较 不同HRCT评分的比较，在HRCT评分方面观察组要高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。在观察组中65例患者HRCT评分≤4分，35例患者>4分。HRCT评分≤4 的IPF患者血清、BALF中KL-6的表达水平要低于>4分的患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。
表3 不同HRCT评分患者临床样本中KL-6水平比较
2.4 KL-6在IPF稳定期和AEIPF患者血清中的水平比较 与IPF稳定期患者相比，KL-6在AEIPF患者血清中的表达水平明显升高(P<0.05)，见表4。
表4 KL-6在稳定期和急性加重期患者血清中的比较
2.5 KL-6表达水平与肺功能指标、HRCT评分的相关性分析 统计结果分析显示KL-6与FVC、FEV1% pred、DLco% pred呈明显的负性相关(P<0.05)；
与HRCT评分呈正相关(P<0.05)。见表5。
表5 IPF患者临床样本中 KL-6与肺功能参数、HRCT 评分的相关性
2.6 KL-6预测特发性肺纤维化发生效能 ROC曲线结果显示，血清KL-6、肺功能DLco% pred对于预测IPF发生的AUC值分别为：0.9380、0.9700。其中KL-6的cutoff值敏感度0.907，特异性0.833；
肺功能DLco% pred的cutoff值敏感度0.937，特异性0.889。KL-6与DLco% pred预测IPF发生的临床效能均可靠。见图1。
图1 ROC曲线统计血清KL-6、肺功能DLco% pred对IPF发生的预测效能
IPF是一类难治性的间质性肺病，其进展速度快，治疗效果差，患者的死亡率居高不下[9]。在过去十年中，除吡非尼酮、尼达尼布两个抗纤维化药物外，在治疗领域几乎没有新进展[9]。上述抗纤维化药物虽然在一定程度上缓解了IPF患者的肺功能，但患者的生存期仍不理想。因此，寻找诊断IPF的生物标志物对疾病的早期判断、病情评估、临床预后具有重要的临床意义。与现有的诊断方法相比，血清标志物的检测操作简单，可以尽早地对IPF进行诊断，在整个疾病过程中可以动态地进行病情评估。
KL-6 是AECsⅡ细胞膜上的糖类蛋白，在I型肺泡上皮细胞、细支气管上皮细胞表面也有少量表达[10]。AECsⅡ在慢性损伤条件下，自身修复功能受损，过多分泌KL-6蛋白，诱导了成纤维细胞向肌成纤维细胞分化，促进胶原蛋白产生，加速了肺间质纤维化的进展，最终形成了终末期蜂窝肺的影像学表现[11-12]。国外有学者已经发现了KL-6从上皮细胞脱落进入外周血循环中与结缔组织病肺间质病变程度明显相关，且随病的严重程度的变化，KL-6在血液中的浓度会逐渐升高[13-14]。在本研究结果中借助临床样本也发现了KL-6 与IPF有关，KL-6在IPF患者血清中的浓度要高于正常健康人群。这与KL-6在IPF进展中的基础研究报道是相符的。
呼吸困难往往是IPF患者最明显的临床症状，而当患者出现明显呼吸困难时，通常提示患者的肺部可能已经出现了纤维化[15]。但要确诊IPF及评估病情严重程度仍需借助于传统的HRCT及肺功能检查项目。IPF在HRCT的特征性表现是双下肺沿胸膜下分布的“蜂窝”影，肺功能则主要表现为限制性肺通气功能障碍和弥散功能障碍[16]。通过上述两项检测可以间接反映其病理损伤程度，因为当肺间质中出现及肌成纤维细胞聚集及过度的胶原蛋白沉积的时候往往是造成肺间质增宽及“蜂窝”影的重要原因，同时这也意味着IPF病情已进入晚期[17-18]。在临床实践中，早期的IPF并无特异性的临床表现，又因为老年患者作为IPF发病的主要人群往往无法配合肺功能的实施给临床的诊断、评估病情及判断预后都成为目前临床面临的难题。
国外报道及本项目研究已经发现了KL-6在IPF患者与健康对照患者的临床样本中存在明显的差异性表达[19-20]。鉴于这一发现，本项目推测KL-6对IPF的早期诊断、病情评估、判断预后均有帮助。研究中除了发现IPF患者血清和BALF中KL-6表达水平升高外，还发现了KL-6与肺功能指标中FVC、FEV1% pred、DLco% pred呈负性相关，同时HRCT显示肺纤维化程度、受累范围增加的IPF患者中，KL-6的血清浓度也是升高的。在随访IPF患者期间，发生急性加重的患者的血清样本中KL-6的表达水平升高程度更为显著。此外，本研究通过ROC曲线分析结果发现，KL-6在预测IPF发生机率中均有较高的效能。这些结果均提示KL-6可作为早期诊断IPF、监测病情进展、判断预后的一项良好的临床参考指标。
尽管在IPF的研究领域中还有诸多问题尚不明确，但是生物标志物可以帮助解决IPF患者早期诊断、早期干预等精准医疗的重要问题。同时IPF新药的上市也迫切需要可靠的生物指标对其治疗效果进行精准评估。本研究虽然验证了KL-6在IPF患者临床样本中表达的临床意义，但其作为标志物分子联合诊断IPF的特异性、准确性还有待进一步扩大临床样本量进行深入研究。
KL-6表达水平的高低与IPF患者的肺功能参数、HRCT评分、病情严重程度之间有明确的相关性，可作为IPF病情评估、预后判定的生物学指标。
猜你喜欢 肺纤维化程度评估 我国研究人员探索肺纤维化治疗新策略中老年保健(2022年2期)2022-11-25遗传性T淋巴细胞免疫缺陷在百草枯所致肺纤维化中的作用昆明医科大学学报(2022年4期)2022-05-23滇龙胆草对肺纤维化小鼠肺组织NF-κB和CTGF表达的影响昆明医科大学学报(2021年4期)2021-07-23精致和严谨程度让人惊叹 Sonus Faber(意大利势霸)PALLADIO(帕拉迪奥)PW-562/PC-562家庭影院技术(2021年5期)2021-07-21第四代评估理论对我国学科评估的启示大学(2021年2期)2021-06-11男女身高受欢迎程度表意林(2021年2期)2021-02-08评估依据质量与标准化(2015年9期)2015-07-10沙利度胺治疗肺纤维化新进展天津医科大学学报(2015年3期)2015-06-05立法后评估:且行且尽善浙江人大(2014年5期)2014-03-20将内燃机摩擦减小到最低程度汽车与新动力(2014年5期)2014-02-27
