液相色谱法测定辣椒中克百威农药残留量的不确定度评定
时间：2021-02-05 08:00:58 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
摘要 [目的]了解测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药多残留量不确定度的主要来源，通过一些方法对不确定度贡献度大的进行改善修正，从而进一步提升检测结果的可靠性。[方法]对辣椒中克百威农药残留的不确定度进行评定和分析，找出影响不确定度的因素，对各个不确定度分量进行评估并比较各分量对总不确定度的贡献，从而给出测定结果的置信区间。[结果]分析得出影响结果的主要不确定度分量是色谱仪峰面积的测定和总重复性。[结论]在检测过程中，需在检测前做好仪器平衡和调试，确保仪器处于良好的工作状态，并在重复检测时尽可能排除其他干扰。
关键词：液相色谱法；克百威；不确定度
中图分类号：S481+.8 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2015）08-089-03
近年来，食品安全问题日益凸显，蔬菜农药残留已经成为人们最关心话题之一，因此农药残留检测数据的准确性至关重要。为了提供更公正、更准确的检测数据，测量不确定度作为判定测量结果准确度的一个重要依据，是实验室质量体系建立的重要部分，实验室认证时也对其有明确要求，因此受到了各检测实验室的重视，各实验室对其进行了广泛的研究与讨论[1-6]。克百威属高毒杀虫剂，被农业部禁止在蔬菜上使用，但偷用、滥用现象屡有发生，辣椒在南方需求量非常大，但病虫害多，农药检出率较高，为此，笔者选择对辣椒中克百威农药残留量进行了测量不确定度评定，旨在为农药残留检测提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品。鲜辣椒为市售。
1.1.2 试剂。乙腈，甲醇，二氯甲烷，氯化钠，超纯水（哇哈哈纯净水经纯水器过滤所得）。
1.1.3 主要仪器。岛津LC-20A液相色谱仪（氨基甲酸酯分析系统）；检测器为荧光检测器（λex 330 nm，λem 465 nm）；柱子为C8（4.0 mm×250.0 mm），5 μm。
1.2 分析条件 柱温及衍生温度：50 ℃；柱后衍生：0.05 mol/L氢氧化钠溶液，流速0.3 ml/min；OPA试剂，流速0.3 ml/min；反应器温度：100 ℃。保留时间定性，外标单标法峰面积定量。检测时，室温（25±3）℃。
1.3 方法 依据NY/T761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定第3部分：蔬菜和水果中氨基甲酸酯类农药多残留的测定》改动的非标方法测定。
将鲜辣椒用打样机打碎混匀，称取10.00 g样品放入50 ml离心管中，加入5.00 g氯化钠，再加入25.00 ml乙腈，充分混匀，用低速离心机4 500 r/min离心4 min，使乙腈相和水相充分分层，室温下静置5 min。从离心管中吸取5.00 ml乙腈溶液，放入10 ml试管1中，将试管放在氮吹仪上氮吹，设置水浴温度70 ℃，缓缓通入氮气，将乙腈氮吹蒸发至近干，加入2.00 ml甲醇+二氯甲烷（1+99）溶解残渣，待净化。将氨基柱用4.0 ml甲醇+二氯甲烷（1+99）预洗条件化，当溶液液面到达柱吸附层表面时，立即加入上述待净化溶液，用10 ml试管2收集洗脱液，用2 ml甲醇+二氯甲烷（1+99）洗试管1后过柱，并重复1次。将试管2置于氮吹仪上，水浴温度50 ℃，氮吹蒸发至近干，用2.00 ml 10%甲醇溶解残渣。样品在混匀器上混匀后，经0.2 μm有机针式过滤器过滤，吸取10.0 μl净化后的样品溶液注入液相色谱仪中待分析。
1.4 计算公式
ω=C标×A样×V1×V3×1 000/（A标×m×V2×R×1 000）
式中，ω——样品中农药的含量，mg/kg；
C标——标准溶液中克百威浓度，μg/ml；
A标——标准溶液中克百威峰面积，mV*s；
A样——样品中克百威峰面积，mV*s；
m——样品的质量，g；
V1——提取溶液总体积，ml；
V2——提取溶液分取的体积，ml；
V3——样品溶液定容体积，ml；
R——样品加标回收率，%。
2 结果与分析
2.1 识别不确定度的来源 液相色谱法检测辣椒中克百威的标准不确定度urel（ω）主要来源：① 检测方法总重复性导致的相对不确定度urel（rep）；② 标准溶液浓度引入的标准不确定度urel（C标）；③ 样品称量引入的标准不确定度urel（m）；④ 样品前处理溶液体积引入的标准不确定度urel（V）；⑤ 标准溶液峰面积测定引入的标准不确定度urel（A标）；⑥ 样品峰面积测定引入的标准不确定度urel（A样）；⑦ 样品加标回收率引入的不确定度urel（R）。
从测定方法看，各影响参数相对独立，合成标准不确定度可用相对标准不确定度合成：
2.2 量化不确定度分量
2.2.1 检测方法总重复性导致的相对不确定度urel（rep）。
按照该方法对样品加标中的克百威含量分别进行测定，检测结果为
0.170、0.173、0.169、0.167、0.165、0.168、0.171、0.169、0.167和0.170 mg/kg。
=0.168 9（mg/kg） s（w）=0.002 283（mg/kg）
实际测量时，一般对样品测定2次作为测量结果，则：
u（w）=s（）=s（w）2=0.001 614（mg/kg）
其相对标准不确定度为：
urel（rep）=u（w）=0.009 56（mg/kg）
2.2.2 克百威标准溶液引入的相对标准不确定度urel（C标）。
