[不同配方培养基对果蝇生长和繁殖的影响] 果蝇简易培养基配方
时间：2019-05-14 03:16:39 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
摘 要：为了筛选出最适果蝇生长的培养基，以遗传实验室饲养的4种果蝇为试验对象，比较了5种不同培养基对果蝇生长发育周期和繁殖后代的影响，结果筛选出了水果培养基和改进的玉米粉培养基，对比得出前者所培养的果蝇三龄幼虫个体明显较大，生长周期也较后者缩短1 d左右，而后者所培养的果蝇子代数量要多于前者。
关键词：果蝇；不同培养基；生长；繁殖
中图分类号：R151 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006－6500.2012.03.035
Effect of Different Culture Medium on Growth and Reproduction of Deosophia
BIAN Li-hong, YUAN Hong-mei,WANG Yang, QU Li-na
(School of Life Science ,Daqing Normal University ,Daqing, Heilongjiang 163712,China)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: To choose good culture of Drosophila, the main genetic laboratory in our hospital for the experimental breeding of the four Drosophila object, by comparing the 5 - different media on the growth and development of Drosophila reproduction cycle and the impact of selected media and improvement of fruit corn Powder formulations of two media, and by further experiments comparing the former culture obtained from Drosophila larval size is relatively larger, the growth cycle of a day or so shorter than the latter.
Key words: Drosophila; different media; growth; reproduction
果蝇（Drosophlia meianogaster）分为黑腹果蝇和黄腹果蝇，属双翅目小型昆虫，为完全变态类型，生活史包括卵、幼虫、蛹及成虫4个发育时期，是经典的遗传学实验材料[1]。果蝇作为一种重要的模式生物，具备繁殖力强、世代周期短、变异类型多且饲养简单等特点。果蝇性状受环境和遗传的相互作用，用于饲养果蝇的培养基成分与含量对果蝇的大小、发育、繁殖与生存有着重要影响，因此，果蝇培养基成分的优化随着果蝇在遗传学研究中的广泛应用成为了各实验室的研究热点。国外许多实验室都有自己的培养基配方但差异较大，国内也有果蝇培养基筛选研究，如龚慧明[2]对果蝇培养基易发霉变质问题的处理措施的研究；陈宗礼和延志莲[3]对果蝇培养基的选择研究，他们用小麦加工料代替玉米粉缩短果蝇生长周期、提高其繁殖力；还有孙英男等[4]利用果蝇喜食腐烂水果的习性尝试制作香蕉果冻培养基等。但这些研究中有些培养基配制成本较高，不适于在实验室使用，且目前对果蝇在不同培养基条件下生长发育过程和后代繁殖的研究也并不详细。本试验主要是通过对不同培养基条件下果蝇生长以及繁殖规律的研究，筛选出最适宜果蝇生长的培养基类型，从而加快果蝇的生长，缩短果蝇繁殖周期，减少饲养果蝇培养基的污染，提高果蝇饲养成活率。为大庆地区果蝇饲养过程中遇到的生长慢、繁殖周期长、易污染等问题提供解决方法。
1 材料和方法
1.1 试验材料
选用生命科学学院遗传实验室饲养的4种果蝇为试验对象，设计5种配方的培养基，每个配方每个品种做2个批次重复，记录果蝇从卵到三龄幼虫到蛹到成虫的整个阶段的时间、阶段之间的过渡时间和存活天数以及繁殖数量，根据果蝇在不同配方培养基条件下生长周期的变化以及后代繁殖的数量等方面来评价、筛选出最适合果蝇生长的培养基。
1.2 试验仪器及用具
微波炉、电子分析天平、鼓风干燥箱、立式高压蒸汽灭菌锅各1台；光学显微镜、解剖镜、恒温培养箱。烧杯、250 mL试剂瓶、麻醉瓶、载玻片、玻璃棒、毛笔、吸水纸、放大镜、培养瓶、棉塞。
1.3 果蝇培养基的配方
卵磷脂对果蝇寿命有一定影响[5]，添加小麦加工料的培养基更适于果蝇生长[6]，通过前人的研究借鉴到一些培养基防霉、防污染的方法，考虑到果蝇喜腐烂水果的习性[7]，同时参考前人制作香蕉果冻培养基的方法，加以总结和创新，设计了5种适于实验室配置的培养基，分别为改进的玉米粉培养基[8]、未改进的玉米粉培养基、添加卵磷脂的玉米粉培养基、面粉培养基、水果培养基。具体配方如下。
（1）改进的玉米粉培养基：蔗糖15 g、红糖15 g、玉米粉40 g、酵母粉4 g、琼脂粉4 g、苯甲酸钠0.5 g、水380 mL、丙酸2.5 mL。
（2）未改进的玉米粉培养基：蔗糖6.2 g、玉米粉8.25 g、酵母粉0.7 g、琼脂粉0.62 g、水76 mL、丙酸0.5 mL。
(3)添加卵磷脂的玉米粉培养基：蔗糖15 g、玉米粉40 g、酵母粉4 g、琼脂粉4 g、苯甲酸钠0.5 g、水380 mL、丙酸2.5 mL、19 g鸡蛋黄。
(4)面粉培养基：面粉40 g、蔗糖15 g、红糖15 g、酵母粉4 g、琼脂粉4 g、苯甲酸钠0.5 g、水380 mL、丙酸2.5 mL。
(5)水果培养基：香蕉19 g、苹果19 g、琼脂粉1.4 g、水76 mL、苯甲酸钠0.1 g、丙酸0.5 mL、酵母粉0.8 g。 1.4 果蝇的培养
将果蝇移入培养瓶中，每瓶5对，在移入前要对果蝇进行检查，一般用乙醚进行麻醉，选取雌雄。处女蝇在果蝇羽化后8 h 内挑出，移入后，将瓶横卧，以免果蝇粘在培养基上，待果蝇苏醒后即可将培养瓶放入恒温培养箱培养[9-11]。
1.5 果蝇生长过程的观察记录
每天定时观察，详细记录果蝇从卵到三龄幼虫到蛹到成虫的整个阶段所经历的时间、阶段之间的过渡时间和存活天数以及繁殖数量。在亲代果蝇产卵前添补死亡或残损了的亲蝇，并在亲蝇产卵后到羽化前的时间内将其移出培养瓶以免影响对后代群体数量的统计[12-13]。
1.6 果蝇繁殖后代数量的记录
记录果蝇后代群体数量时，事先将浸有乙醚的棉花团塞入麻醉瓶盖，然后将培养瓶中的子代果蝇移入麻醉瓶中，移入果蝇后迅速盖上麻醉瓶盖，待果蝇完全麻醉后即倒出计数，自出现幼蝇起连续记录3 d的子代蝇数。
2 结果与分析
2.1 5种配方的培养基对果蝇生长的影响
5种配方的培养基对4种果蝇生长的影响结果见表1~表5。
由表1可知，用改进的玉米粉培养基饲养的果蝇，白眼和野生型品种比黑檀体和残翅生长效果更好，平均生长周期缩短1~2 d，且子代数量明显更多。
由表2可知，用未改进的玉米粉培养基饲养的果蝇。4个品种的果蝇生长周期相同，繁殖的子代数量由多到少依次是野生型、残翅、白眼、黑檀体，且经观察发现培养基较早出现发霉现象。
由表3可知，用添加卵磷脂的培养基饲养的果蝇，黑檀体和白眼品种较残翅和野生型生长周期缩短1 d，其中野生型果蝇子代数量明显多于其他3种果蝇，其次是黑檀体，再次是残翅，而白眼果蝇子代数量甚少，可能由于没有发现亲蝇缺失而及时填补所致。
由表4可知用面粉培养基饲养的果蝇，白眼和残翅品种生长效果相当，黑檀体较前两者生长周期延长1 d，子代数量也最少，而野生型较黑檀体生长周期缩短2 d，且子代数量明显较前3个品种多。
由表5可知用水果培养基饲养的果蝇，白眼和野生型较其他两个品种果蝇生长周期缩短1 d，对于繁殖子代的数量野生型要多于其他3种果蝇，其次是黑檀体，另外两个品种果蝇相当。
5种配方培养基对果蝇生长周期和繁殖数量的影响结果见图1和图2。
改进的玉米粉培养基所饲养的果蝇子代数量要多于水果培养基，但生长周期平均缩短1 d左右。并且通过观察发现，水果培养基所培养的果蝇三龄幼虫个体明显较大，认为以上结果是由于改进的玉米粉培养基比较酥松，更适于酵母粉的发酵[14]，而水果培养基则能提供更丰富的营养[15]所致。
3 结 论
（1）改进的玉米粉培养基和水果培养基较其他培养基而言，更适于果蝇的生长和繁殖。
（2）对于同一品种的果蝇来说，在改进的玉米粉培养基中饲养的繁殖力更强，在水果培养基中饲养的生长周期更短，三龄幼虫更大。
（3）在遗传学试验研究中可根据需求选择饲养果蝇的培养基类型，如果试验需要利用三龄幼虫，则应优先选择水果培养基；若需要数量较多的果蝇群体，则使用改进的玉米粉培养基。
参考文献：
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[2] 龚慧明.果蝇培养基长霉的处理措施[J].生物学教学,2007,32(4):52.
[3] 陈宗礼,延志莲.果蝇培养基的选择研究[J].生物学杂志,1994(3):31-33.
[4] 孙英男,李国泰,郑艳杰,等.香蕉果冻培养基人工培养果蝇初试[J].通化师范学院学报,2000(2):33-36.
[5] 徐承水.不同脂类对果蝇寿命的比较研究[J].曲阜师范大学学报:自然科学版,2000,26(4):79-80.
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[12] 贾永红.实验果蝇的一些饲养技巧和注意事项[J]. 生物学通报, 2007,42(7):55-56.
[13] 陈晓芸.果蝇的饲养[J]. 生物学通报,2006,41(2):51.
[14] 顾蔚,车娜克,单玉龙,等.酵母粉对果蝇精子发生之影响[J].西北大学学报:自然科版,2006,36(6):932-935.
[15] 李怀仪,王新民,谭健权,等.云芝多糖对果蝇的繁殖力和寿命的影响[J].中国药理报,1993(14):44-46.
收稿日期：2012-02-21；修订日期：2012-04-17
作者简介：卞立红（1979-），女，黑龙江肇东人，讲师，博士，主要从事遗传学研究。
