银耳和黑木耳中果胶含量测定方法的研究:水果果胶含量列表
时间：2019-01-03 03:25:21 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
摘 要: 菌类食品中的营养成分很多,有丰富的维生素、蛋白质、氨基酸、微量元素,以及果胶,果胶的含量测定有多种,本文研究了三种测定果胶含量的方法。 关键词: 银耳 黑木耳 果胶 重量法 比色法
一、实验部分
1.样品处理
将干燥样品研细,使之通过150um筛:由于两种样品溶液比较粘稠所以只称取2.0000克样品(黑木耳粉和白木耳粉)于洁净烧杯中,加入热的70%乙醇,充分搅拌以提取糖类,抽滤,反复操作至滤液不呈糖类的反应。残渣用99%乙醇洗涤,再用乙醚洗去脂肪,风干掉乙醚。
2.总果胶的提取
用150mL加热至沸的0.05mol/L盐酸溶液把漏斗中残渣毫无损失地移入250mL锥形瓶中,装上冷凝器,于沸水浴中加热回流2小时,冷却后移入250mL容量瓶中,加甲基红指示剂2滴。加0.5mol/L氢氧化钠中和,摇匀,定容。
其中黑木耳颜色较深影响中和,特别是2.0000g的黑木耳,但这不要紧,中和只是大概的,仔细看还是能看出来,对于1.0000g的黑木耳溶液影响更浅。
由于样品比较粘稠,因此要用布氏漏斗抽滤,并且抽滤瓶应该洁净干燥,收集滤液即得总果胶提取液。在抽滤过程中发现黑木耳溶液太过粘稠,很明显黑木耳取量太多,所以,又称取了1.0000g的样品进行实验以和2.0000g的样品进行对照。
二、重量法[1]
1.测定
取25mL提取液(能生成果胶酸钙25mg左右)于500mL烧杯中,加入0.1moL/L氢氧化钠溶液100mL,充分搅拌,放置0.5小时,再加入1mol/L乙酸溶液50mL,放置5分钟,边搅拌边缓缓加入1mol/L氯化钙溶液25mL,放置1小时(陈化),加热煮沸5分钟,趁热用烘干至恒重的G2垂融坩埚过滤,用热水洗涤至无氯离子(用0.1mol硝酸银溶液检验)为止。将垂融坩埚置于105℃烘箱中干燥至恒重。数据如下:
表1 重量法数据
公式X=W×10×0.9233/(M×1000)。
2.小结
此法操作简单,精密量取得次数较少,试验误差较小,但是,根据实验条件所得果胶酸钙少,容易带来误差,此法适合含果胶多的样品的测定。
三、咔唑比色法[2]
1.原理
果胶经水解生成半乳糖醛酸,在强酸中与咔唑试剂发生缩合反应,生成紫红色化合物,其呈色强度与半乳糖醛酸含量成正比,可比色定量。在0―140ug/mL(文献数据)半乳糖醛酸溶液范围内呈良好的线性关系。
2.试剂
(1)0.15%咔唑乙醇溶液:称取咔唑0.15g,溶于精制乙醇并定容至100mL。
(2)精制乙醇:取无水乙醇或95%乙醇1000mL,加入锌粉4g,1:1硫酸4mL,在水浴中回流10小时,用全玻璃仪器蒸馏,馏出液每1000mL加锌粉和氢氧化钾各4g,重新蒸馏一次。
(3)半乳糖醛酸标准溶液:用水配制成含量为2g/L。
3.样品测定
取果胶提取液10.00ml于100ml的溶量瓶中定容(含半乳糖醛酸10―70mg/L),吸取2mL样品稀释液于预先加入了12mL冷却的硫酸的试管中(冰浴冷却),充分混合后,再置冰水浴中冷却,然后在沸水浴中加热10分钟,冷却至室温后,加入0.15%咔唑试剂1mL,充分混合,置室温下放置30分钟,以试剂空白调零,在530nm波长下测定A530nm与标准样对照。
分别准曲吸取半乳糖醛酸标准储备液(2.002mg/ml)0、1、2、3、4、5、6ml于100ml的容量瓶中定容,得半乳糖醛酸标准应用液。分别吸取2mL半乳糖醛酸标准应用液于预先加入了12mL冷却的硫酸的7支试管中(冰浴冷却),充分混合后,再置冰水浴中冷却,然后在沸水浴中加热10分钟,冷却至室温后,加入0.15%咔唑试剂1mL,充分混合,置室温下放置30分钟,以试剂空白调零,在530nm波长下测定A530nm标准曲线的绘制与数据:
表2 咔唑比色法数据
说明:上表中的浓度一项不是整数,这是由实验条件计算得来。
由于此法数据重复性差,标准曲线令人不甚满意,所以果胶含量未予计算。
4.小结
此法标准曲线在此试验条件下,数据重复性很差,难以得到较满意的R值。为了得到满意的标准曲线,我们进行了五次的试验,以上数据是最好的一次,但是还是不满意。可以得出结论,在此试验条件下,用此法测定本样品中的果胶含量不是很好的。
四、3,5―二甲苯酚显色法[3]
1.仪器和试剂
(1)0.1%的3,5―二甲苯酚溶于30ml的冰醋酸中,并用冰醋酸定容至100ml。
(2)半乳糖醛酸标准储备液(2.002mg/ml准确称取0.5005g的样品溶于蒸馏水中定容至250ml。
(3)0.3M的NaCl准确称取1.7526g的NaCl溶于蒸馏水,定容至100ml。
(4)无水乙醇、优级纯硫酸、0.05N的盐酸。
2.标准曲线的绘制
分别准曲吸取半乳糖醛酸标准储备液(2.002mg/ml)0、1、2、3、4、5、6ml于100ml的容量瓶中定容,得半乳糖醛酸标准应用液。取7支大试管分别加入半乳糖醛酸标准应用液0.5ml,水1.1ml,0.3M的氯化钠0.2ml,再分别徐徐加入浓硫酸8.0ml充分混合,冷却至室温,然后在85度的水浴中加热20分钟,冷却后分别和0.2ml的3,5―二甲苯酚,室温显色25min后以空白管为参比,1cm比色皿在432nm处测定各管吸光度,绘制标准曲线。
表3 3,5―二甲苯酚显色法数据
3.样品测定步骤
取“一实验部分”中果胶提取液10.00ml稀释10倍定容与100ml的容量瓶中。吸取稀释液0.5ml与大试管中,以下操作同标准曲线的绘制,同时做空白实验,以空白管为参比测定样品管的吸光度,并从标准曲线中计算出果胶的含量。
表4 样品吸光度数据如下
4.小结
在进行此法实验时,糖分被充分提取,样品中基本不含糖分,从试验数据可以看出R值比较令人满意,线性关系很好。
五、结语
我们认为重量法虽然操作简单,但是所得果胶钙的量太少,不合适果胶含量少的样品的测定,而咔唑比色法数据重现性差,效果令人不满意。3,5―二甲苯酚显色法在此试验条件下效果最好,因此,推荐用此法测定本样品中的果胶含量。
参考文献:
[1]蒋萍初,金继波,张棉花.果胶含量的测定[N].化学世界,1988,(02).
[2]徐汶,王光辉.咔唑比色法测定豆腐柴叶果胶含量的研究[J].食品安全与检测,2006,(3).
[3]周桂,蓝平.桔皮中果胶含量测定[J].广西民族学院学报,1995.10.VOL1,(2).
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