柱前衍生化—HPLC检测亚氨基二乙酸法制备双甘膦反应进程的研究
时间：2021-02-05 08:02:17 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
摘要[目的]建立一种利用亚氨基二乙酸制备双甘膦的新检测方法。[方法]以9-芴基甲氧羰酰氯为衍生化试剂对合成双甘膦的反应物进行衍生化。采用Gemini C18 （150.0 mm ×4.6 mm， 5.0 μm）色谱柱，室温下以0.05 mol/L NaH2PO4 （pH=3.5）溶液-乙腈（V/V，60∶40）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长265 nm，对反应液中的亚氨基二乙腈、亚氨基二乙酸和氨气衍生物进行分离检测。[结果]反应液中的亚氨基二乙腈、亚氨基二乙酸和氨气衍生物，分别在0.02～1.20、0.02～1.20、0.10～2.00 mg/mL浓度范围内呈现良好的线性关系（r≥0.999 8），检出限分别为0.000 4、0.000 4、0.003 0 mg/mL，加样回收率分别为99.96%、99.86%、99.89%，相对标准偏差均不超过1.6%。[结论]该研究建立的方法可用于亚氨基二乙酸法制备双甘膦反应体系的跟踪分析。
关键词亚氨基二乙酸法；双甘膦；高效液相色谱；衍生化
中图分类号O657.7文献标识码A文章编号0517-6611（2017）14-0012-02
Abstract[Objective] To establish a new inspection method for preparation of PMIDA with iminodiacetic acid.[Method] The derivatives of the reaction solution for synthesizing PMIDA were synthesized using 9fluorenyl methyl chloroformate （FMOCCl） as the derivatization reagent.The separation of the derivatives was performed on a Gemini C18 column at room temperature by isocratic elution.The mobile phase composed of 60% 0.05 mol/L NaH2PO4 （pH=3.5） and 40% CH3CN at a flow rate of 1.0 mL/min.The injection volume was 10 μL and the detection wavelength was 265 nm.[Result] The linear ranges of the derivatives of iminodiacetonitrile， iminodiacetic acid and ammonia were respectively 0.02-1.20 mg/mL， 0.02-1.20 mg/mL and 0.10-2.00 mg/mL with correlation coefficient of more than or equal to 0.999 8.The detection limits for the derivatives were respectively 0.000 4， 0.000 4 and 0.003 0 mg/mL.The average recoveries of 3 derivatives were respectively 99.96%， 99.86% and 99.89% with relative standard deviation values less than or equal to 1.6%.[Conclusion] The method developed in the present paper could be used for trace analysis of the reaction system for preparation of PMIDA by iminodiacetic acid.
Key wordsIminodiacetic acid；PMIDA；HPLC；Derivatization
草甘膦是美國孟山都公司于1974 年商品化的灭生性有机膦类除草剂[1]，是目前世界农药市场上吨位最大、销售额最高的除草剂品种。双甘膦是制备草甘膦的重要中间体[2-3]，其生产过程中涉及的物质包括亚氨基二乙腈、亚氨基二乙酸和氨气等。在实际生产过程中需要一个准确的分析检测方法对整个工艺流程进行中间控制，了解原料以及中间体的反应消耗情况，才能对整个生产工艺过程做出正确的分析和判断。为此，建立一种能快速准确监控双甘膦制备进程的分析方法就显得尤为重要。
由于该反应过程中涉及的含氮化合物的结构中均缺少发色团，难以采用常规的高效液相色谱法（HPLC）直接测定。为此，笔者根据高效液相色谱中脂肪胺类化合物的柱前衍生原理[4]，以荧光试剂9-芴基甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）[5-7]与反应液中的胺类化合物柱前衍生，然后用HPLC进行分离测定。
1材料与方法
1.1材料Shimadzu LC-2010型高效液相色谱仪，日本岛津；FMOC-Cl（>99%），Sigma-Aldrich；亚氨基二乙腈（纯度≥98%），广州江城石化；氢氧化钠（含量≥98%）、盐酸（含量35%），国药集团；亚磷酸（含量89%），上海实诚；甲醛（含量37%），上海凌风；乙腈（色谱纯），北京百灵威；超纯水，自制。
1.2方法
1.2.1标准品衍生方法。称取亚氨基二乙腈、亚氨基二乙酸、合成中间体等标准样品约25.0 mg置于50 mL容量瓶中，加20 mL硼酸缓冲液（0.2 mol/L、pH 7.5），再加20 mL FMOC-Cl乙腈溶液（0.4 mmol），用乙腈定容至刻度，在室温25 ℃下放置10 min，配制成0.5 mg/mL浓度的待测标准样品溶液。
