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    神经干细胞移植与神经节苷脂合用对脑损伤大鼠神经学功能恢复的作用 新生儿急性胆红素脑损伤神经节苷脂

    时间:2019-05-13 03:16:36 来源:雅意学习网 本文已影响 雅意学习网手机站

      【中图分类号】R651 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2012)06-0019-01  【摘要】目的 神经干细胞移植与神经节苷脂合用(GM1)观察两者对脑损伤大鼠恢复中的作用。方法 用健康大鼠制成重型液压颅脑损伤模型,随机分成2组,损伤组(培养液移植组),神经干细胞+GM1组,脑损伤后24 h、3 d 及伤后1、2、3、4 周行动物神经学缺损评分,在脑损伤后21~28 d 进行Morris 水迷宫试验。结果 移植后1、2、3、4周,大鼠神经学缺损评分及水迷宫测试结果显示,神经干细胞移植可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经功能,联合应用GM1有协同效果。讨论 神经干细胞移植可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经学功能,联合应用GM1 有协同效果。
      【关键词】 脑损伤 神经干细胞移植 神经节苷脂 神经学功能
      神经干细胞(neural stem cells,NSCs)具有自我增殖能力和多向分化潜能,一定条件下可以分化成神经系统的各种细胞。GM1是神经节苷脂的一种,GM1具有明显促进神经细胞修复的作用[1] 。文章通过GM1治疗联合NSCs移植观察两者对大鼠脑梗死后神经功能恢复的影响。
      1、 资料与方法
      1.1 一般资料
      2008-11/2009-03在天津医科大学内分泌研究所完成此项研究。胎龄约为15 d的Wistar胎鼠12只,清洁级Wistar 大鼠78只,雌雄各半,质量250~300g,购自中国医学科学院动物实验室(动物质量合格证号:SCXK20060007)。实验中对动物处置方法符合动物伦理学要求。
      1.2 方法
      随机区组法分为2组,每组各39只。200g/L的乌拉坦按1.2 g/kg经腹腔内注射麻醉后,采用液压颅脑损伤仪,按国际通用标准,对各组给予253.312~303.975 kPa峰值的冲击压力,制成重度大鼠液压颅脑损伤模型。损伤后出现自主呼吸暂停者,立即用小动物呼吸机给予面罩吸氧。伤后24 h将大鼠再次麻醉,打开原先骨窗,立体定向注射。
      损伤组:注射1mL DMEM/F12培养液组;NSCs+GM1组同法注射等量的NSCs悬液(1×1010 L-1)后经腹腔注射神经节苷脂水溶液(30 mg/kg)1次/d,连续3d。于骨窗边缘分3点注入,每点2μL,深度为硬膜下3.0 mm,留针10 min,缓慢退针,缝合头皮。腹腔注射庆大霉素2000 U抗菌治疗,回笼饲养。
      1.3 评估标准
      神经功能评估:大鼠运动神经功能评价采用Bederson 等的神经学缺损评分法,在脑损伤后24 h及伤后3 d,1、2、3、4周进行,评分的标准如下:0分,无明显的神经功能缺失;1分,对侧前肢屈曲;2分,提尾时对侧前肢抓力下降;3分,各方向自主运动,但提尾时向左侧旋转;4分,自发性向左侧旋转。评分越低表示神经运动功能恢复越好。
      Morris水迷宫试验:在脑损伤后23~28 d进行Morris水迷宫装置检测学习记忆能力。空间定航实验:历时5d半,记录每只大鼠从入水到找到并爬上平台所需的时间,即逃避潜伏期(escaping latency);空间探索实验:第5天下午撤掉平台,让大鼠在迷宫内自由活动2 min,记录其经过平台原址的次数(times of passing platform)。
      1.4 统计学方法
      采用SPSS 17.0统计软件进行完全随机设计的方差分析,数据以x±s表示,两组之间的两样本t取教训检验比较用Dunnett t 检验以P
      2、 结果
      实验选用大鼠78只,随机选取造模成功的60只分为2组,无脱失,全部进入结果分析。神经功能评价2组大鼠不同时间神经学缺损评分,移植后1~4周,大鼠神经学缺损评分NSCs+GM1组明显低于损伤组,差异有非常显著性意义(P

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