蛋白质盐析实验报告巧做蛋白质的盐析实验

时间：2019-02-05 03:26:57　来源：雅意学习网本文已影响人

　　文章编号：1005－6629(2008)04－0011－02中图分类号：G633.8 文献标识码：C 　　　　蛋白质的盐析实验是中学课本上的一个传统实验。由于许多教师在实验准备与操作中不得要领，致使实验失败或得不到理想的效果。笔者经认真研究，获得了该实验的成功的关键及注意事项。
　　实验用品：试管、鸡蛋白溶液、过饱和 (NH4)2SO4溶液
　　实验步骤
　　
　　1 蛋白质溶液的制备
　　
　　取一个鸡蛋，在小的一端打个小孔并刺破里面的膜，向下倾斜旋转着让蛋清流入小烧杯里[1](注意不要让蛋黄流入)。向烧杯内注入60～80mL的蒸馏水，用玻璃棒轻轻搅动。可见，蛋清中的清蛋白溶于水，而球蛋白则显絮状物析出。然后用铺有4～5层纱布的漏斗过滤。得80mL左右的鸡蛋白溶液。
　　
　　2 制备饱和(NH4)2SO4溶液
　　
　　先向洁净烧杯中加入适量的蒸馏水，再加(NH4)2SO4固体使之溶解并配成近饱和溶液，然后取40mL倒入小试剂瓶中，向此瓶中再加入半角匙硫酸铵粉末，制成饱和溶液。
　　
　　3盐析实验
　　
　　3.1取2mL左右的蛋白质溶液于洁净的试管中，然后挤压盛饱和硫酸铵溶液小瓶上滴管的胶帽，使吸进滴管内的溶液中含有少许未溶解的硫酸铵固体粉末。将该饱和溶液逐滴加入盛鸡蛋白溶液的试管中，大约加入2mL左右，可见蛋白质溶液呈现明显的絮状物析出。
　　3.2向上述试管中滴加水，加水量约为3ml时，可观察到沉淀又溶解，形成透明溶液。再取该溶液1mL滴加饱和的硫酸铵溶液足量，又发现变浑浊；再加水足量又成澄清溶液。现象相当明显且有趣味性。
　　
　　4 实验注意事项
　　
　　4.1 过滤鸡蛋白溶液时要用多层纱布
　　一般4～5层为佳，以防止溶液中混进球蛋白。
　　4.2 选用的盐为(NH4)2SO4溶液
　　研究证明：在等电点时蛋白质的溶解度最低[2]。因此，选用的盐溶液pH在等电点时蛋白质易从溶液中分离出来。卵蛋白的等电点为4.84～4.90，饱和硫酸铵溶液显酸性，其pH十分接近于等电点[3]，具有很强的盐析能力。
　　4.3 滴加足量的饱和硫酸铵溶液
　　实验对比证明：滴加含有少量颗粒的饱和的硫酸铵溶液效果最佳，明显优于滴加其饱和溶液和单独加入硫酸铵的固体粉末。滴加饱和硫酸铵的溶液应足量。一般情况下，取用蛋清溶液与硫酸铵溶液的体积比大约为1∶1。有的老师操作此实验时，常因滴加硫酸铵溶液太少没能出现现象而认为实验失败，这是很可惜的。
　　4.4 实验过程中不要剧烈振荡
　　若在实验过程或在析出沉淀后振荡，可能会产生极细小的沉淀使实验现象不明显，或者因振荡过于剧烈可能造成蛋白质变性致使再加入水后无法使之成为透明的溶液。
　　蛋白质的盐析实验看似简单，但要获得理想的实验效果，却受多种因素制约。正如已故著名化学家傅鹰教授所言：“做研究最宝贵的是经验，因为那是有钱也买不来的。”信哉！
　　
　　参考文献：
　　[1]刘怀乐.中学化学实验与教学研究[M].重庆：西南师范大学出版社，1996：184.
　　[2]袁履冰，高占先，陈宏博.有机化学[M].北京：高等教育出版社，2005：438.
　　[3]大连理工大学化学教研室.无机化学[M].北京：高等教育出版社，2005：123.

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