苎麻根腐线虫综合防控技术规程
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DB43 湖 南 省 地 方 标 准 DB43/T—2020
苎麻根腐线虫病综合防控技术规程 Regulation for Integrated Prevention and Control Technology of Ramie root rot nematode disease
2020
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发布 2020-
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实施 湖南省市场监督管理局
发 布
DB43/T—2020
I 目
次
前
言 ............................................................................. 1 1 范围 ............................................................................... 2 2 规范性引用文件 ..................................................................... 2 3 术语和定义 ......................................................................... 2 4 苎麻根腐线虫病发生流行规律 ......................................................... 2 5 苎麻根腐线虫病害诊断 ............................................................... 3 6 苎麻根腐线虫的综合防控方法 ......................................................... 3 7 建立防治档案 ....................................................................... 4 附录 A（资料性附录）
苎麻根腐线虫病症状 .............................................. 5 附录 B（规范性附录）
苎麻根腐线虫形态学鉴定、分子生物学检测方法 ....................... 6 附
录
C （资料性附录）
苎麻根腐线虫病防治档案 ...................................... 8
DB43/T—2020 1 前
言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由湖南省农业农村厅提出。
本标准由湖南省农业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：湖南省植物保护研究所。
本标准主要起草人：朱春晖、张德咏、刘勇、成飞雪、程菊娥、解啸、孙书娥、王东伟
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苎麻根腐线虫病综合防控技术规程 1 范围 本标准规定了苎麻根腐线虫病的术语和定义、发生流行规律、病害诊断、综合防控方法、防治档案等技术要求。
本标准适用于苎麻根腐线虫病的综合防控。
2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
GB 4285
农药安全使用标准 GB 8321
农药合理使用准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。
3.1 综合防控技术 Integrated Prevention and Control Technology 综合防控是基于“预防为主、综合防治”的植保方针，以确保农业生产、农产品质量和农业生态环境安全为目标，以减少农药使用为目的，优先采取生态调控、生物防治、物理防治和科学用药等资源节约型、环境友好型技术来控制农作物病虫害的植物保护措施。
3.2 苎麻根腐线虫病 Ramie Root Rot Nematode Disease 由咖啡短体线虫引起的苎麻根腐线虫病。
3.3 阳性对照 Positive Control 凡是确定可以出现预期结果的处理，称为阳性对照。
3.4 阴性对照 Negative Control 凡是确定不会出现预期结果的处理，称为阴性对照。
3.5 空白对照 Blank Control 凡是不加处理因素的处理，称为空白对照。
4 苎麻根腐线虫病发生流行规律
DB43/T—2020 3 苎麻根腐线虫病
苎麻根腐线虫病是导致苎麻败蔸的主要病害，苎麻根腐线虫的主要病原是咖啡短体线虫。病原线虫生活的适宜温度为25-28℃，田间土壤温度是影响其孵化和繁殖的重要条件，温度高于33℃时繁殖量大大下降，温度高于40℃或低于4℃时就很少活动，65℃下10分钟可导致死亡。苎麻根
腐线虫在干燥或过湿土壤中，活动受到抑制，而地势高、土壤质地疏松、盐分低土壤适宜线虫活动，所以砂土土壤往往发病较重。由于根腐线虫的入侵，引起根部皮层细胞产生坏死伤痕，从而极易遭受其它病原菌如镰刀菌属（Fusarium）、腐霉属（Pythium）、以及黑腐霉（Thielaviopsis）等真菌的侵害，形成复合感染，加重对苎麻的危害。
5 苎麻根腐线虫病害诊断 5.1 病害田间诊断 苎麻根腐线虫病主要是由短体属线虫为害而引起的，主要为害苎麻根部，特别是苎麻的萝卜根。受害麻株初期根常出现黑褐色不规则病斑，稍凹陷，后渐扩大为黑褐色大病斑，并深入木质部使之变黑褐色海绵状朽腐，质地疏松似糠状，病灶交接处常见黑绿色病变。而被害麻兜地上部分常常表现出麻株减少且矮小，叶片发黄，干旱时凋萎，发病严重时整根腐烂，麻株枯死。参见附录A。
5.2 形态学检测 检测方法和检测结果见附录B 5.3 分子生物学检测 检测方法和检测结果见附录B 6 苎麻根腐线虫病的综合防控方法 6.1 防治原则 苎麻根腐线虫病的防治以预防为主，重视农业措施，合理使用农药，进行综合防治。防治方法主要有农艺措施、化学药剂防治以及生物防治。以“预防为主，综合防治”为指导思想，根据苎麻根腐线虫的发生规律及危害特点，从农田生态系统整体出发，保护生物多样性，优化生产环境，尽可能消灭和减少线虫来源，尽量减少化学农药的使用角度开展综合防控，实现生产安全、生态环境安全和菜产品质量安全。
6.2 农业措施防治 田园卫生：在定植前，结合整地，清除病残体，铲除田间及周边杂草。及时拔除病株，带出田外深埋或烧毁。
农艺措施：进行抗性育种，选用抗病品种是防治苎麻根腐线虫病最直接有效的方法。苎麻不同品种间抗根腐线虫病差异显著，如独山圆麻、牛耳青和湘苎二号的抗性强而黑皮蔸和黄壳早则较易感病。此外，实行高垄栽培，适时开沟排水，降低地下水位，也可有效降低虫口密度，抑制根腐线虫的危害。
6.3 药剂防治 药剂使用应符合GB 4285和 GB 8321的相关规定。
药剂防治：对重病麻园有必要进行施用化学药剂进行防治。如选用噻唑膦、辛硫磷、氯唑磷等化学农药进行开沟施药，或是在苎麻移植前利用棉隆或威百亩进行土壤熏蒸。
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6.4 生物防治 生物药、肥防治：随着环境保护意识的加强，苎麻根腐线虫病的化学防治也逐步转向生物防治。利用生物农药或微生物肥料抑制苎麻根腐线虫病的发生。如用阿维菌素（乳油或颗粒剂）对苎麻根腐线虫病有较好的防治效治。施用微生物肥料可有效改善苎麻生长的微生态环境，使土壤中的有益菌增多，促进土壤中有益菌群的形成，这些有益菌群可分泌酶类物质，抑制根腐线虫的存活；同时，往土壤中施入生物肥可疏松土壤，利于根系的生长，根系健壮，在一定程度上可提高根系的抗线虫能力等。
在苎麻的头麻冒芽期，取苎麻根部的土壤用贝曼漏斗法分离鉴定土壤中的线虫种类和数量。用光合细菌和BT菌剂分别稀释200倍，混合，用喷雾器喷施苎麻根部，每蔸平均喷施液体100 mL，选在药后12小时无雨的当天喷药，每隔5-7天喷施一次，连续喷施3次。
头麻收获后，取苎麻根部的土壤用贝曼漏斗法分离鉴定土壤中的线虫种类和数量。收获当天即可用药，用光合细菌和BT菌剂分别稀释200倍，混合，用喷雾器喷施苎麻根部，每蔸平均喷施液体100 mL，选在药后12小时无雨的当天喷药，每隔5-7天喷施一次，连续喷施3次。
二麻收获后，取苎麻根部的土壤用贝曼漏斗法分离鉴定土壤中的线虫种类和数量。收获当天即可用药，用光合细菌和BT菌剂分别稀释200倍，混合，用喷雾器喷施苎麻根部，每蔸平均喷施液体100 mL，选在药后12小时无雨的当天喷药，每隔5-7天喷施一次，连续喷施3次。
苎麻冬培期，一般选在12月底或者1月初，用光合细菌和BT菌剂分别稀释200倍，混合，用喷雾器喷施苎麻根部，每蔸平均喷施液体100 mL，选在药后12小时无雨的当天喷药。
7 建立防治档案 在田间调查苎麻根腐线虫病发生情况时，具体调查内容参见附录C。
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5 附录 A （资料性附录）
苎麻根腐线虫病症状 苎麻根腐线虫病主要是由短体属线虫为害而引起的，主要为害苎麻根部，特别是苎麻的萝卜根。受害麻株初期根常出现黑褐色不规则病斑，稍凹陷，后渐扩大为黑褐色大病斑，并深入木质部使之变黑褐色海绵状朽腐，质地疏松似糠状，病灶交接处常见黑绿色病变。而被害麻兜地上部分常常表现出麻株减少且矮小，叶片发黄，干旱时凋萎，发病严重时整根腐烂，麻株枯死。（图 A1）。
图 图 A1
苎麻 根腐线虫病为害症状
( 成飞雪 2009 年摄于湖南省沅江市)
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附录 B （规范性附录）
苎麻根腐线虫形态学鉴定、分子生物学检测方法
一、 苎麻根腐线虫形态学鉴定 土壤中或者根中分离的线虫显微镜下形态图为图 B1。线虫形态的大小符合表 B1 数据，则为咖啡锻体线虫引起的苎麻根腐线虫病害。
表 表 B1 咖啡短体线虫形态特征测量值
测量项目 测量值范围 雌虫(mm) 雄虫(mm) L 体长 0.37-0.69 0.43-0.70 a 体长/最大体宽 17.7-30.5 25.6-40.0 b 体长/体前端至食道与肠连接处的距离 4.0-7.8 4.9-7.0 b´体长/体前端至食道腺末端的距离 3.3-5.1 3.8-4.8 c 体长/尾长 13.7-26.9 12.3-24.0 c´尾长/肛门处体宽 1.8-2.4 2.3-3.5 V 体前端至阴门的距离×100/体长 75.8-84.2
St (μm)
口针长度 12.5-17.8 13.8-17.5 图 图 B1
苎麻 根腐线虫病 病原咖啡短体线虫
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7 二、 苎麻根腐线虫分子生物学鉴定 取病麻兜及周围土样，分别采用浅盆法或蔗糖漂浮离心法分离苎麻根样中或土样中线虫。取分离的单条线虫用灭菌水清洗3次，放于0.2 mLPCR薄壁管中，-20℃冷冻10 min，加小量PKase，65℃消化1 h，95℃灭活10 min，离心上清液作为PCR反应模板。引物：5’-CGTAACAAGGTAGCTGTAG-3’和5’-TCCTCCGCTAAATGATATG-3’。94℃ 预变性4 min，之后94℃变性30 sec，退火温度62℃ 30 sec，72℃延伸45 sec，28个循环，72℃延伸10 min。取扩增产物8 μL，加入到1.5%琼脂糖凝胶（100 mL 1.5%琼脂糖凝胶含有5 µL DNAgreen）的点样孔内。电泳缓冲液1×TAE，120 V，电泳30 min。电泳结束后，取出琼脂糖凝胶，通过凝胶成像仪观察结果并拍照记录，扩增片段与预期目标条带大小一致，则结果判定为阳性，未扩增出预期大小条带，则结果判定为阴性；若阳性对照未扩增出预期大小片段或空白对照扩增出任何条带，则检测结果失败，需要重新检测。进一步可以通过克隆扩增片段、测序及比较分析，加以确认检测结果。
图 图B2
苎麻根腐线虫（800 bp ）PCR 检测（ （M ：Marker,1-4, 阳性，CK ：阴性 ）800bp
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附
录
C（资料性附录）
苎麻根腐线虫病防治档案 表 C1 防治档案记录表格 类型
日期 前茬 作物 病虫害发生情况
曾使用过防治方法防治病害 当茬作物 当前使用防治方法 病情指数 线 虫数量
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