腺苷药物预适应对缺血心肌的保护作用_对缺血心肌有保护作用的药物是
时间：2020-03-17 07:23:11 来源：雅意学习网 本文已影响 人 
【摘要】目的：分析腺苷药物预适应对缺血心肌的保护作用及Mn-SOD、ICAM-1�iNOS的含量变化。方法：试验用Wistar大鼠140只，随机分为：对照组�心肌梗塞组�IP组�腺苷PP1个循环组�腺苷PP2个循环组�腺苷PP3个循环组�腺苷PP4个循环组。通过TTC（Triphenyltetrazoliumchloride）染色方法来测定心肌梗塞的面积；通过氧化还原酶法测定血清中的Mn-SOD、ICAM-1�iNOS的含量变化。结果：⑴心肌梗塞面积在心肌梗塞组中最大，IP后心肌梗塞面积有明显的下降，两者之间有明显的统计学差异。在PP三个循环组，心肌梗塞面积达到最小，在PP四个循环组，心肌梗塞面积较PP三个循环组稍有升高，两者之间没有统计学差异（p>0.05）。⑵心肌梗塞以后Mn-SOD含量与对照组相比明显升高(p0.05)。⑶心肌梗塞以后血清中的ICAM-1含量表达较对照组有明显的升高，两者之间有统计学差异（p[1]，在体内应用某些药物可以部分的模拟IP的过程，称此过程为药物预适应(PharmacologicpreconditionPP)。本实验就是在建立大鼠心肌梗塞模型和IP、PP模型的基础上来探讨Mn-SOD、iNOS、ICAM-1在IP及腺苷PP过程中含量表达的变化和腺苷PP作用及其临床意义，以期为冠心病的防治提供更好的指导。�
1材料和方法�
1．1试验动物：Wistar大鼠，3－6个月，体重150g左右，雌雄不限（购于浙江省人民医院实验动物中心）。�
1．2主要仪器：千分之一天平(METTLER公司)；动物用呼吸机(浙江大学动物仪器厂)；紫外可见分光光度计(上海医用设备厂)；显微镜(OLLIMPUS公司)。�
1．3主要药品：腺苷注射液（沈阳光大药业公司）；TTC试剂（浙江省华东医药股份公司）；伊凡蓝试剂（瑞士Restang公司）；Mn-SOD、ICAM-1、iNOS检测试剂（南京建成生物有限公司）。�
2试验分组�
试验用Wistar大鼠140只，随机分为7组，每组20只：�
A组对照组只开胸暴露心脏，不结扎冠状动脉，24小时后取血清和心肌标本供检测用。�
B组心肌梗塞组结扎冠状动脉后1小时，关闭胸腔。24小时后取血清和心肌标本供检测用。�
C组IP组结扎冠状动脉前降支5分钟，放松3分钟，做三个循环。24小时以后，结扎冠状动脉前降支1小时，取血清和心肌标本供检测用。�
D组腺苷PP组�
D1组PP1个循环组腺苷PP24小时，结扎冠状动脉1小时。取血清和心肌标本供检测用。�
D2组PP2个循环组腺苷PP24小时，再注射相同剂量，做二个循环。24小时以后，结扎冠状动脉前降支1小时，取血清和心肌标本供检测用。�
D3组PP3个循环组腺苷PP24小时，再注射相同剂量，做三个循环。24小时以后，结扎冠状动脉前降支1小时，取血清和心肌标本供检测用。�
D4组PP4个循环组腺苷PP24小时，再注射相同剂量，做四个循环。24小时以后，结扎冠状动脉前降支1小时，取血清和心肌标本供检测用。�
3动物模型的建立�
3．1建立心肌梗塞动物模型。�
3．2建立IP动物模型。�
3．3建立腺苷PP模型�
4标本的收集和处理�
4．1Mn-SOD暴露下腔静脉，抽取静脉血3ml，4000转�分钟离心5分钟，取血清置于－20℃低温冰箱保存。�
4．2心肌标本试验终点时间，剪下心脏，剪下梗塞部位。�
5试验检测�
5．1心肌梗塞面积的检测：按TTC染色的方式进行。�
5．2Mn-SOD、ICAM-1、iNOS的检测：严格按照说明书操作进行。�
6统计分析�
资料以均数±标准差表示，各试验组之间比较用T检验，组内之间比较用单因素方差分析。P0.05）。�
7．3Mn-SOD的测定结果
心肌梗塞以后血清中的Mn-SOD含量表达较对照组有明显的升高，两者之间有统计学差异（p0.05）�
8讨论�
PP对心肌有明显的保护作用，腺苷是机体能量代谢的产物，主要来源于ATP降解。心脏短暂缺血后大量ATP降解，导致局部心肌组织腺苷积聚[2-3]。SOD是体内自由基重要的清除酶之一，有三种不同的类型，分别命名为：Mn-SOD、Cu/Zn-SOD和Fe-SOD。Mn-SOD在IP中发挥了重要的作用，而在IP第一相中产生的Mn-SOD还可能在第二相保护作用中发挥了更大的保护作用[4-6]。Yamashita的研究则指出Mn-SOD蛋白表达的高峰和IP发挥作用的时间相同，并且Mn-SOD的含量和心肌梗塞面积呈负相关。国外学者Yamashita曾经指出Mn-SOD可能是缺血IP的最终效应器[6]。NOS分为两大类，即原生型NOS(constitutiveNOS，cNOS)和诱生型NOS(inducibleNOS，iNOS)。缺血后几分钟内iNOS活性即增加，继之NO浓度升高，随时间的延长iNOS蛋白表达下降；NOS已被选择性地确定为预适应延迟相的调节物。在野生型小鼠，初发预适应后24hiNOS的表达和活性增强。无iNOS等位基因的纯和型小鼠缺乏延迟相预适应的保护作用[7-10]。ICAM-1又称CD54，是分子量为76～114KD的单链糖蛋白，微血管内皮是其主要的靶细胞。许多研究证实，发生脑缺血、脑和脊髓缺血再灌注损伤，ICAM-1表达增加，使得白细胞与血管内皮细胞间粘附力增加,进而贴壁、滚动、嵌塞微血管,造成局部血液动力学环境改变。白细胞跨过内皮细胞间隙进入周围组织，释放大量炎性介质和细胞因子，造成缺血区域的脑组织损伤，并吸引更多的白细胞进入组织，形成恶性循环[11-13]。�
在人类通过开胸建立IP模型的可能性不大，建立PP效应显得极为重要，通过我们的研究也发现在PP过程中体内的抗氧化系统发挥了重要的作用，分析在PP过程中iNOS做为始动因子发挥作用，ICAM-1做为中间因子起作用，而MN-SOD可能做为效应物质发挥作用，但是三者之间如何发挥进一步的作用，尚待研究。�
9结论�
9.1腺苷PP以后可以明显的减少心肌梗塞的面积；�
9.2腺苷发挥PP的作用可能也需要机体内的抗氧化酶系统参与。
参考文献�
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